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胚胎体外最多可培养5至7天，即胚胎阶段，通常培养3至5天的胚胎进行移植，如果时间长度影响胚胎的生存和正常发育，则需要培养到第3或5天。建议孕期的需要正常的孕检，注意备孕期间及时补充叶酸。

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胚胎体外培养(胚胎的第1～6天) 正常受精卵必须放到提前准备好了的胚胎培养液内培养。培养的当天(第1天)，胚胎应该分裂l次，成为2细胞; 第2天再分裂l次成为4细胞;到第3天时，好的胚胎应该是分裂了3次的8细胞，有时也会出现4～7细胞或大于8细胞的胚胎。 如果这时候不移植胚胎，胚胎必须移到新鲜配制的胚胎培养液里继续培养约48～72小时。这时候，好的胚胎应该分裂了6次以上并形成囊胚。有的囊胚开始孵化 或已完全从透明带中孵化出来，特别是第6天的胚胎。 而不好的胚胎可能停留在某一阶段，只有囊胚可以用来移植，多余的囊胚可以冷冻保存，其他时期的胚胎可以认为已停止发育，一般情况下丢弃。

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专家指出：为了选择质量更好的胚胎，大多数试管婴儿中心选择第3-6天胚胎来移植。此时依据患者的年龄，曾经怀孕与否及胚胎的质量，决定移植胚胎的数目。具体情况请咨询医生了解。

早期卵泡的体外培养技术可以在整个培养阶段连续研究单个卵泡,而且能研究特定物质与卵泡发育的关系。

关于早期卵泡体外培养已经做了很多研究,且早期卵泡能培养发育到不同阶段(45~47)。不过,该研究主要在大型哺乳动物中开展,包括山羊(48)、绵羊(49~51)、牛(52~56)和猪(57~59)。

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EGF和bFGF能维持山羊的窦前卵泡(preantralfollicle)存活,而胰岛素样生长因子Ⅰ不能维持山羊窦前卵泡存活但能激活卵泡的生长。胰岛素、促卵泡素、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、胰岛素样生长因子Ⅱ和血管内皮生长因子能激活牛窦前卵泡的发育(54,56,60)。

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胰岛素样生长因子和表皮生长因子能促进猪卵泡颗粒细胞增生并抑制窦前卵泡的凋亡(表3.2)。

卵巢组织的来源、特性和利用

卵巢皮质储存着大量的原始卵泡,是体外成熟培养中未成熟卵子的主要来源。研究用的人卵巢皮质经主要获得途径有:经病人同意在子宫切除术或者卵巢切除术中(12,46,47)、绝育女性做腹壁部分切

除术或者腹腔镜手术中(14,45,46)和在剖宫产时做卵巢活检获得。除了这种有限的卵巢组织境外合法辅助介入,变性者(女性变男性)也是卵巢皮质组织的一个潜在来源(62)。

胎儿卵巢(妊娠晚期流产女婴)和青春期前的女孩卵巢组织单位面积的原始卵泡最多,也是卵泡的来源。

成年女性病人卵巢皮质中原始卵泡的分布不均匀且随着女性年龄增加的卵泡密度降低,因此在研究比较不同培养条件对人卵泡的影响时,胎儿卵巢和青春期前的女孩卵巢组织被普遍认为原始卵泡的最理想的来源。

胎儿卵巢和青春期前的女孩卵巢组织中丰富的原始卵泡确实能更好地说明不同培养条件对卵泡的影响。因此,许多研究偏爱将胎儿卵巢组织作为卵泡来源(16~18)。

由于人和大型动物整个卵巢体积较大,将其整个培养时营养物质不能在卵巢不同区域顺利传导,气体交换困难且随着代谢废物的积聚经常导致卵巢坏死,因此不能将整个卵巢进行培养。

鉴于此,经常将大型哺乳动物卵巢皮质切成薄片进行培养。培养卵巢组织的优点在于其不仅能保存结构完整的组织,还使得卵巢间质和卵泡能进行相互的物理作用。

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